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耐药细胞株的细胞冻存与复苏原理
点击次数:226 发布时间:2018-04-03
  耐药细胞株的细胞冻存与复苏原理:
  在不加任何条件下直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等,能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。
  细胞复苏时速度要快,使之迅速通过细胞zui易受损的-5~0℃,细胞仍能生长,活力受损不大。
  目前常用的保护剂为二甲亚砜(DMSO)和甘油,它们对细胞无毒性,分子量小,溶解度大,易穿透细胞。
  耐药细胞株细胞特点:
  1.传代情况:P2
  2.活性好、稳定性高、适应性强,易培养
  3.传代快、多:2-3天传一代,普通可传10代以上 肿瘤细胞无限制
  4.纯度高达95% 无污染和其他杂细胞
  5.有技术疑问可以提供一对一的解答:专业,及时,耐心
  6.货期短,一般冻存管5-7个工作日,复苏7-15个工作日。
  耐药细胞株前期需要准备:
  *构建好的外源基因载体
  *待转染的细胞系(1×106个细胞,可传代,倍增时间小于48小时)以及细胞培养条件的说明
  *若需要检测靶基因的表达变化,请提供相应抗体
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